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头孢氨苄人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

文献类型: 中文期刊

作者: 赵启法 1 ; 张改平 2 ; 职爱民 2 ; 宋春美 2 ; 张晓辉 2 ; 王爱萍 1 ;

作者机构: 1.郑州大学生物工程系

2.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室

关键词: 头孢氨苄;人工抗原;合成;多克隆抗体;制备

期刊名称: 西北农业学报

ISSN: 1004-1389

年卷期: 2012 年 21 卷 07 期

页码: 20-24+90

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为合成头孢氨苄(Cefalexin,CEX)的人工抗原,制备特异性的CEX多克隆抗体。采用戊二醛法合成头孢氨苄全抗原CEX-BSA、CEX-OVA,紫外分光光度计(ultraviolet spectrophotometry,UV)、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴定,用CEX-BSA免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定多抗血清效价,阻断ELISA鉴定其敏感性、特异性。结果显示,紫外扫描测得CEX-BSA、CEX-OVA中CEX和BSA、OVA的分子结合比分别为21.7∶1和14.6∶1;SDS-PAGE结果表明,BSA的泳动速度大于CEX-BSA,说明CEX-BSA的分子质量大于BSA,进一步说明CEX与BSA偶联成功;2号小鼠抗血清的效价最高,对CEX的IC50为769.588μg/L,与头孢拉定的交叉反应率为1.283%,与其他药物无交叉反应。说明通过系列ELISA鉴定,获得高价、敏感、特异的多克隆抗体。

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