文献类型： 中文期刊

作者： 李彬 ¹ ; 毛立 ¹ ; 何孔旺 ¹ ; 温立斌 ¹ ; 茅爱华 ¹ ; 张雪寒 ¹ ; 倪艳秀 ¹ ; 郭容利 ¹ ; 马俊杰 ¹ ; 周俊明 ¹ ; 吕立新 ¹ ; 俞正玉 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 猪博卡病毒;NP1基因;克隆;原核表达

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2011 年 26 卷 03 期

页码： 28-31

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 猪博卡病毒是近年来新发现的一种细小病毒。本研究根据其部分基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了一对引物,采用PCR方法扩增出了猪博卡病毒的NP1基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组质粒pET32a-NP1,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为46 kDa的融合蛋白,蛋白表达量较高,而且蛋白以可溶性形式存在于菌体中。表达产物经纯化后,目的蛋白纯度较好。Western Blot结果显示,表达的NP1蛋白能与His抗体发生特异性的免疫反应,表明原核表达的NP1蛋白具有良好的反应原性。