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马铃薯M病毒微滴数字PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 刘晗 1 ; 黄洁芳 1 ; 向均 1 ; 燕照玲 1 ; 张永江 1 ;

作者机构： 1.中国检验检疫科学研究院;吴江出入境检验检疫局;河南省农业科学院农业经济与信息研究所

关键词： 马铃薯;马铃薯M病毒;微滴数字PCR;实时荧光RT-PCR;检测

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 69-74

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立马铃薯M病毒(Potato virus M,PVM)的精准检测技术,根据PVM外壳蛋白基因核苷酸保守序列设计微滴数字PCR(dd PCR)的引物、探针,建立PVM的dd PCR检测技术。以田间采集并经RT-PCR验证的PVM及其他4种同样可侵染马铃薯的病毒(PVX、PVY、CMV、TMV)总RNA为模板,进行dd PCR特异性分析;对PVM的总RNA进行10倍梯度稀释并用作模板,进行dd PCR灵敏度测定。结果表明,建立的dd PCR方法可以特异性地检测马铃薯上的PVM,与实时荧光RT-PCR结果一致;最低可检测5.7 fg/μL的总RNA,比实时荧光RT-PCR灵敏度高100倍。说明建立的dd PCR检测方法可用于PVM的准确鉴定。

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