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影响生长抑素重组质粒pEGS/2SS转染HeLa细胞效果的因素研究

文献类型： 中文期刊

作者： 何晓红 1 ; 曹少先 2 ; 茆达干 3 ; 杨利国 4 ;

作者机构： 1.南京农业大学动物科技学院

2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

3.江苏省农业科学院畜牧研究所

4.华中农业大学动物科技学院

关键词： 脂质体;HeLa细胞;生长抑素重组质粒pEGS/2SS

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2010 年 41 卷 03 期

页码： 279-285

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在分析生长抑素重组质粒pEGS/2SS转染HeLa细胞(人宫颈癌上皮细胞)转染效果的影响因素,探讨最佳转染条件,为进一步研究生长抑素基因疫苗的作用机制和作用效果奠定基础。以脂质体转染法将带有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的重组质粒pEGS/2SS转染HeLa细胞,探讨质粒转染HeLa细胞最佳条件的4个参数:质粒DNA剂量、脂质体剂量、最佳转染时间和质粒提取方法,在荧光显微镜下观察细胞转染情况并计算转染率。结果:在六孔细胞培养板上,当DNA/脂质体剂量为1μg/6μg时,转染效率最高,在转染后72 h达到34.02%;当用Plasmid Maxi Kit试剂盒提取质粒,转染时间为48 h,转染效率最高,达到17.88%。重组质粒pEGS/2SS转染He-La细胞条件是:采用试剂盒(Plasmid Maxi Kit)提取的质粒,DNA和脂质体的剂量分别为1μg与6μg,转染时间48 h,此时的转染效率最高,达17.88%。

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