文献类型： 中文期刊

作者： 高芳銮 ¹ ; 范国成 ¹ ; 沈建国 ¹ ; 谢荔岩 ¹ ; 林奇英 ¹ ; 吴祖建 ¹ ; 谢联辉 ¹ ;

作者机构： 1.福建省植物病毒学重点实验室福建农林大学植物病毒研究所

关键词： 水稻瘤矮病毒;P8蛋白结构分析;融合蛋白;抗血清

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2009 年 29 卷 08 期

页码： 51-56

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为揭示水稻瘤矮病毒(RGDV)外层衣壳蛋白P8的结构特点及其在大肠杆菌中的表达特性。利用生物学软件和在线分析工具,对RGDVP8蛋白结构特征进行了生物信息学分析;同时将通过RT-PCR扩增的P8基因克隆到pGEX-4T-1上,构建pGP8转化大肠杆菌E.coliBL21(DE3),在IPTG诱导下表达。利用表达的融合蛋白免疫家兔,制备了抗血清,并以RGDV、水稻矮缩病毒(RDV)、水稻条纹病毒(RSV)、水稻锯齿叶矮缩病毒(RRSV)4种病毒作为供试材料进行特异性检测。分析显示P8蛋白在C端位置有一个典型的跨膜螺旋区,整个蛋白也具有Phytoreo P8家族共有的典型结构域Phytoreo P8 domain。SDS-PAGE和蛋白印记分析表明,RGDVP8融合蛋白分子量约为73kDa,以包涵体的形式获得了高效表达。获得的效价高、特异性强的抗血清,为水稻瘤矮病毒的快速检测及P8蛋白的功能研究奠定了基础。