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猪肺炎支原体P97基因抗原决定簇R1区的克隆与表达

文献类型: 中文期刊

作者: 刘茂军 1 ; 邵国青 1 ; 张映 2 ; 聂向庭 2 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室

2.山西农业大学动物科技学院

关键词: 猪肺炎支原体;P97基因;克隆;表达

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2005 年 21 卷 03 期

页码: 207-211

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 通过引物定点突变PCR法,扩增了猪肺炎支原体(Mhp)168株黏附因子P97基因抗原决定簇R1区基因片段,并将该基因片段插入表达载体pET-32 a(+)中构建重组质粒,再将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)。DNA序列分析结果表明所构建的重组质粒含有正确的目的基因。经0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)37℃诱导4 h,重组质粒表达的目的蛋白量可达到总蛋白的23%。W estern b lotting和ELISA试验结果证明所表达的重组蛋白具有猪肺炎支原体抗原性。

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