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杂色鲍Fosmid基因组文库构建与血蓝蛋白基因筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 姜敬哲 1 ; 张彬彬 2 ; 张远 2 ; 苏友禄 1 ; 王江勇 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院南海水产研究所

2.华南农业大学生命科学学院

关键词： 杂色鲍;Fosmid;基因组文库;血蓝蛋白;文库筛选

期刊名称： 华南农业大学学报

ISSN： 1001-411X

年卷期： 2012 年 33 卷 02 期

页码： 192-196+202

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以杂色鲍Haliotis diversicolor肌肉组织为材料,按照CopyControlTM Fosmid Library Production Kit中方法构建了杂色鲍Fosmid全基因组文库.从文库中随机挑取50个克隆进行NotⅠ酶切鉴定发现,阳性率达到100%,插入片段大小分布在32～48 kb之间,平均长度约37.6 kb.随机挑取8个克隆进行正、反向末端测序,获得了全部16个测序结果,其中8条序列确定为鲍来源基因序列.进一步根据杂色鲍血蓝蛋白(Hemocyanin)基因3'端序列设计特异引物,用PCR方法对基因组文库进行筛选,获得一个阳性克隆,经Primer-Walking测序、Blast比对和进化分析证实,该序列为杂色鲍血蓝蛋白Ⅱ型基因克隆.

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