文献类型： 中文期刊

作者： 许盼盼 ¹ ; 杨世鹏 ¹ ; 王丽慧 ¹ ; 孙雪梅 ¹ ; 高洁铭 ¹ ; 李莉 ¹ ; 钟启文 ¹ ;

作者机构： 1.青海大学农林科学院青海省蔬菜遗传与生理重点实验室;青海大学农牧学院;青海大学三江源生态和高原农牧业国家重点实验室

关键词： 改良高盐-低pH法;叶绿体基因组提取;叶绿体分离;菊芋

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2019 年 04 期

页码： 657-663

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以菊芋叶片为材料,通过比较提取其叶绿体DNA的5种方法(改良高盐-低pH法、Percoll密度梯度离心法、GENMED试剂盒物理法、GENMED试剂盒化学法及DNaseⅠ差速离心分离法),筛选出适合菊芋叶绿体NDA的提取方法。利用显微镜、核酸蛋白测定仪、琼脂糖凝胶电泳及菊芋基因特异引物RAPD检测。结果显示:改良高盐-低pH法分离得到的叶绿体在40×物镜下其数目多,浓度高,背景清晰,提取菊芋叶片cpDNA的OD_(260)/OD_(280)为1.926,质量浓度为295.63μg/μL。经10 g/L琼脂糖凝胶电泳检测发现,cpDNA条带清晰整齐,无核DNA污染;且提取的cpDNA通过4对引物均能扩增到片段。结果表明,改良高盐-低pH法能够快速获得菊芋高质量的叶绿体DNA。