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草甘膦人工抗原合成及鼠源多抗血清制备

文献类型: 中文期刊

作者: 王晶 1 ; 王耀 1 ; 王方雨 2 ; 胡骁飞 2 ; 姚静静 2 ; 邓瑞广 2 ; 侯玉泽 1 ; 张改平 2 ;

作者机构: 1.河南科技大学食品与生物工程学院/畜禽疫病诊断与食品安全检测河南省工程实验室

2.河南省农业科学院/农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室

关键词: 草甘膦;人工抗原;多抗血清;ELISA

期刊名称: 核农学报

ISSN: 1000-8551

年卷期: 2017 年 31 卷 01 期

页码: 194-200

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为检测小分子农药草甘膦(PMG)的残留,本研究合成草甘膦[N-(Phosphonomethyl)glycine PMG]人工抗原,通过免疫制备高敏感性、特异性的鼠源PMG多克隆抗血清;采用EDC法将PMG分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫原PMG-BSA和包被原PMG-OVA;经紫外扫描、SDS-PAGE电泳、质谱鉴定后,免疫BALB/c小鼠,制备多抗血清;利用间接ELISA法测定多抗血清效价,竞争ELISA测定多抗血清的敏感性和特异性。结果表明,所合成的免疫抗原效果较好,免疫的4只小鼠效价均达1∶104以上,4号小鼠的多抗血清敏感性最高,半数抑制浓度IC50为31.4μg·m L-1,与其他有机磷类农药无交叉反应,具备良好的特异性。本试验成功合成了PMG人工抗原,并制得了敏感性高、特异性好的鼠源多抗血清,为PMG单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。

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