文献类型： 中文期刊

作者： 席俊 ¹ ; 张改平 ¹ ; 张利娜 ¹ ; 张红 ¹ ; 乔松林 ¹ ; 苗现伟 ¹ ; 何礼洋 ¹ ; 张乃生 ¹ ;

作者机构： 1.吉林大学畜牧兽医学院;河南省农业科学院

关键词： huFcγRⅡ受体;COS7细胞;免疫荧光检测;玫瑰花环试验

期刊名称： 第二军医大学学报

ISSN： 0258-879X

年卷期： 2008 年 09 期

页码： 1110-1113

收录情况： 北大核心

摘要： 目的:建立稳定表达人FcγRⅡ(human Fc gamma receptor Ⅱ,huFcγRⅡ)的真核细胞系,为后续研究奠定基础。方法:采用RT-PCR方法从人外周血白细胞合成FcγRⅡcDNA,构建huFcγRⅡ表达质粒pcDNA3-huFcγRⅡ,经酶切和PCR鉴定后,将pcDNA3-huFcγRⅡ质粒通过脂质体转染法转染COS7细胞,并经G418筛选获得稳定表达huFcγRⅡ的细胞克隆。采用免疫荧光法和玫瑰花环试验检测huFcγRⅡ的表达。结果:构建的pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒经酶切鉴定与预期一致,稳定转入COS7细胞后,经免疫荧光染色,约90%的转染细胞可见荧光,而未转染的COS7对照细胞未见荧光。结论:成功构建pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒,建立了稳定表达huFcγRⅡ的细胞系,为进一步研究奠定了基础。