文献类型： 中文期刊
作者： 单丽丽 1 ; 陆瑞菊 1 ; 王亦菲 1 ; 陆惠丽 1 ; 黄剑华 1 ;
作者机构： 1.上海市农业科学院生物技术研究所
关键词： 春兰;RAPD;DNA;反应体系
期刊名称： 中国农学通报
ISSN： 1000-6850
年卷期： 2008 年 24 卷 01 期
页码： 68-73
收录情况： 北大核心
摘要： 以春兰为研究材料,对春兰基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化。结果表明,在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质,采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类,可以得到高质量春兰基因组DNA。电泳检测表明,所获得的DNA完整,无降解,完全可以满足RAPD等分子标记分析的需要。同时对春兰RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化,建立了适合春兰RAPD分子标记的最佳反应体系,即20μl反应体系中含1UTaqDNA聚合酶,60μmol/LdNTPs,2.25mmol/LMg2+,1.0μmol/L引物,1.5ng/μl模板DNA。
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