文献类型： 中文期刊

作者： 王晓丽 ¹ ; 毕振威 ¹ ; 王永山 ¹ ; 潘群兴 ¹ ; 欧阳伟 ¹ ; 夏兴霞 ¹ ; 诸玉梅 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所

关键词： 犬流感病毒;H3N2亚型;核蛋白;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2017 年 25 卷 01 期

页码： 1-6

收录情况： 北大核心

摘要： 将分离的H3N2亚型犬流感病毒(Canine influenza virus,CIV)A/Canine/Nanjing/11/2012(H3N2)株的核蛋白(NP)基因克隆至原核表达载体p ET28a(+)中,构建重组表达质粒p ET-NP,然后转化大肠杆菌E.coli Rosetta(DE)感受态细胞,经IPTG诱导后,采用SDS-PAGE和Western blot进行分析。结果显示,大肠杆菌表达的重组NP蛋白的分子量约为61 k Da,与预期相符,并能与犬CIV阳性血清发生特异性反应。将表达的重组NP蛋白进行纯化后,免疫大白兔制备抗NP蛋白多克隆抗体血清,Western blot检测该血清可与CIV的NP蛋白发生特异性反应,间接ELISA检测该多克隆抗体血清的效价达1:30 000,显示了较高的抗体效价。本研究为CIV快速检测方法的建立和流行病学调查奠定了科学依据。