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红肉火龙果果糖激酶基因HpFRK1克隆、表达与酶学活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 解璞 1 ; 晏霜 1 ; 王红林 1 ; 郑乾明 1 ;

作者机构： 1.贵州省农业科学院贵州省果树科学研究所

关键词： 红肉火龙果;果糖激酶;基因克隆;表达分析;原核表达

期刊名称： 西北植物学报

ISSN： 1000-4025

年卷期： 2024 年 44 卷 010 期

页码： 1589-1596

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】克隆红肉火龙果果糖激酶基因，检测其表达和酶活性，解析其对果实发育可溶性糖积累的生理功能。【方法】从‘紫红龙’果肉克隆HpFRK1基因，进行生物信息学和亚细胞定位分析，利用qRT-PCR检测基因表达，通过大肠杆菌诱导表达获得重组蛋白并检测酶活性。【结果】HpFRK1的开放阅读框长度为993 bp,编码330个氨基酸，具有磷酸果糖激酶B家族结构域。HpFRK1与甜菜BvFRK亲缘关系最近，均属于细胞质定位的FRKs。HpFRK1在成熟茎和不同发育时期果实均表达，在花后20 d的果实表达量最高，随果实发育逐渐下调，花后30 d（果实成熟）表达量最低。亚细胞定位检测表明HpFRK1主要定位于细胞核和细胞质。诱导获得的HpFRK1重组蛋白特异性催化果糖磷酸化（Km为11.01 mmol/L）。【结论】HpFRK1在细胞质特异性催化果糖磷酸化，在红肉火龙果果实发育期间负调控果实可溶性糖积累。

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