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抑制素质粒的提取与纯化研究

文献类型： 中文期刊

作者： 杨维 1 ; 石国庆 2 ; 夏洁 3 ; 张红琳 3 ;

作者机构： 1.南京晓庄学院行知学院

2.新疆农垦科学院畜牧兽医所

3.南京晓庄学院生命科学系

关键词： 质粒;提取;纯化;碱裂解法;DEAE-纤维柱层析

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2009 年 37 卷 23 期

页码： 10895-10896

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]为抑制素质粒的大量提取与纯化寻找一种成本低的方法。[方法]采用碱裂解法与DEAE-纤维柱层析法提取与纯化抑制素质粒DNA,用分光光度法测定其浓度和纯度。[结果]抑制素质粒DNA的等电点为2.0～2.5,低于大部分蛋白质。pH值为8.0时,抑制素质粒DNA带负电荷,且电荷数量与RNA和蛋白质不同。用紫外分光光度计测定的柱层析后洗脱峰1、2、3在260和280 nm波长处的吸光度值分别为3.01和2.9、0.95和0.51、0.84和0.76,其OD260 nm/OD280 nm分别为1.04、1.86和1.10。3 mol/LNaCl的洗脱峰1大部分是蛋白质,0.6 mol/LNaCl的洗脱峰2是浓度为93.0 ng/ml的抑制素质粒DNA,3 mol/LNaCl的洗脱峰3是杂质。[结论]利用碱裂解法能从大肠杆菌细胞中分离出抑制素质粒DNA,DEAE-纤维柱层析法纯化的抑制素质粒DNA达到了要求的纯度。

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