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芸芥(Eruca.sativa Mill)总DNA提取方法及RAPD扩增体系研究

文献类型： 中文期刊

作者： 范惠玲 1 ; 孙万仓 2 ; 孟亚雄 1 ;

作者机构： 1.甘肃农业大学农学院

2.甘肃省农业科学院经济作物研究所

关键词： 芸芥;SDS;RAPD;影响因素

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2007 年 16 卷 01 期

页码： 17-21

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以芸芥9370为材料,在SDS法的基础上,通过改变离心时间,操作步骤,建立了一种较快速提取芸芥基因组DNA的方法。使用美国伯乐公司生产的Mycycler TM thermal cycler扩增仪,对影响RAPD扩增的因素进行了比较研究,确定了模板、10×buffer(主要含Mg2+)、、dNTPs、引物和Taq DNA聚合酶的适宜量和最佳的循环次数。试验结果表明在25μL体系中使用18.5μL ddH2O,2μL 10×buffer(主要含Mg2+),2μLdNTPs,1μL引物,0.5μL TaqDNA聚合酶,1μL模板;反应条件为94℃预变性4 min,然后进行94℃50 s,38℃退火1 min 20 s,72℃延伸2 min,40个循环后,再在72℃延伸10 min,芸芥RAPD扩增效果较好。

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[2]中国芸芥遗传多样性RAPD标记分析. 孙万仓,官春云,张金文,孟亚雄,刘自刚,张涛,李栒,陈社元. 2003

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