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棉花4-香豆酸辅酶A连接酶基因克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 倪志勇 1 ; 王娟 1 ; 吕萌 1 ; 李波 1 ; 白岩 1 ; 范玲 1 ;

作者机构： 1.新疆农业科学院核技术生物技术研究所

关键词： 棉花;4-香豆酸辅酶A连接酶;基因克隆;原核表达

期刊名称： 西北植物学报

ISSN： 1000-4025

年卷期： 2010 年 30 卷 03 期

页码： 429-436

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究从棉花中克隆了一个4CL基因,命名为Gh4CL2(GenBank登录号为FJ848870)。研究结果表明:Gh4CL2基因cDNA全长2332bp,具有一个1725bp的开放阅读框,5′非编码区为64bp,3′非编码区为543bp,编码574个氨基酸,预测分子量约为62.106kD,等电点为5.94。氨基酸同源性分析发现,Gh4CL2与来自白杨、大豆和紫草的4CL一致性较高。进一步研究Gh4CL2基因的功能,构建了该基因的原核表达载体pET-28a-4CL2,经酶切鉴定后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。SDS-PAGE分析表明,最佳诱导表达条件为0.5mmol/LIPTG在37℃下诱导4h,重组蛋白主要以包涵体形式出现。

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