文献类型: 中文期刊
作者: 成瑜 1 ; 刘昭军 1 ; 刘丽艳 1 ; 李铁 1 ; 赵曦 1 ;
作者机构: 1.黑龙江省农业科学院
关键词: 水通道蛋白;甘露糖筛选体系;TIP
期刊名称: Agricultural Science & Technology
ISSN: 1009-4229
年卷期: 2009 年 05 期
页码: 88-90
摘要: [目的]构建以甘露糖为筛选剂的抗旱、抗盐碱植物表达载体,进一步选育无标记的抗逆作物品种。[方法]利用腊梅花水通道蛋白CpTIPcDNA和大肠杆菌pmi基因构建植物表达载体,将抗逆基因与甘露糖正向选择系统结合。pmi基因植物表达载体(pPMI)的构建:用XhoⅠ酶切植物表达载体pCAMBIA2301,切除Kan基因,并用CIP酶进行去磷酸化,然后与XhoⅠ酶切后PCR产物连接转化。腊梅花水通道蛋白CpTIP基因甘露糖筛选体系植物表达载体(pPMI::CpTIP)的构建:用KpnⅠ和XbaⅠ酶切pPMI植物表达载体和克隆载体,并将酶切后pmi植物表达载体与腊梅花水通道蛋白CpTIP基因连接转化。转化鉴定均按Sambrook等的方法进行。[结果]成功构建了腊梅花水通道蛋白CpTIP基因甘露糖筛选体系植物表达载体pPMI::CpTIP。[结论]所构建的载体结合了抗逆基因和甘露糖正向选择系统的优点,将抗逆基因与环境友好型筛选体系很好的结合起来。
- 相关文献
[1]腊梅花水通道蛋白CpTIP基因甘露糖筛选体系植物表达载体的构建. 成瑜,刘昭军,刘丽艳,李铁,赵曦. 2010
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