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应用PCR-RFLP技术检测短喙矮小综合征鹅细小病毒

文献类型: 中文期刊

作者: 王劭 1 ; 肖世峰 1 ; 林甦 1 ; 程晓霞 1 ; 俞博 1 ; 江丹丹 1 ; 林锋强 1 ; 朱小丽 1 ; 陈仕龙 1 ; 陈少莺 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所;福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;福建农林大学动物科学学院

关键词: 短喙矮小综合征;鹅细小病毒;聚合酶链式反应-限制性片段多态性;SspⅠ限制性内切酶

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2018 年 11 期

页码: 1026-1030

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为准确诊断鸭短喙矮小综合征(SBDS)以及鉴别鹅细小病毒感染鸭群中新发短喙矮小综合征鹅细小病毒(SBDS-GPV),本研究通过对GenBank登录的水禽细小病毒基因组核苷酸序列的比对分析,根据该病毒5'非编码区基因序列特征设计一对特异性引物,建立了SBDS-GPV聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测方法。特异性试验和敏感性试验显示,水禽细小病毒特异性引物可以扩增得到约200 bp的目的片段,SBDS-GPV PCR产物能够被SspⅠ酶切为140 bp和60 bp两个片段,番鸭细小病毒与德兹西氏病小鹅瘟病毒则不能被酶切,检出SBDS-GPV DNA的最低浓度为2.28×10~7拷贝/μL。利用该方法对14份疑似SBDS临床样品检测,阳性样本采用SPF鸭胚进行病毒分离,结果显示SBDS-GPV PCR-RFLP检测的阳性样本经病毒分离均为SBDS-GPV。上述研究表明,该SBDS-GPV PCR-RFLP检测方法特异性强、敏感性高,为SBDS的防控提供了有效手段。

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