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碳二亚胺法制备阿莫西林人工抗原及其鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 刘庆堂 1 ; 王磊 1 ; 职爱民 1 ; 滕蔓 1 ; 胡骁飞 1 ; 孙亚宁 1 ; 宋春美 1 ; 王寅彪 1 ; 张改平 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室

关键词: 阿莫西林;人工抗原;合成;多克隆抗体;碳二亚胺法

期刊名称: 河南农业科学

ISSN: 1004-3268

年卷期: 2012 年 41 卷 03 期

页码: 142-145

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 合成、鉴定了阿莫西林(amoxicillin,AMO)人工抗原,并通过动物免疫法生产了亲和力高、特异性好的鼠源AMO多克隆抗血清。采用碳二亚胺(EDC)法将AMO分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成完全免疫抗原AMO-BSA和检测抗原AMO-OVA,经紫外分光光度法和SDS-PAGE以及动物免疫进行鉴定。结果表明,偶联后的紫外吸收峰与BSA和AMO相比都发生了一定的位移,AMO-BSA在276nm处出现最大吸收峰,BSA的泳动速度大于AMO-BSA。免疫后获得的3只小鼠多抗血清,通过间接竞争ELISA测定,效价可达1×10-4以上,1号小鼠半数抑制浓度(IC50)为573.75ng/mL,敏感性较好。AMO完全人工抗原的合成以及鼠源多克隆抗体血清的制备,为AMO单克隆抗体的制备奠定了基础。

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