文献类型: 中文期刊
作者: 孙敏华 1 ; 李林林 1 ; 董嘉文 1 ; 袁建丰 1 ; 邝瑞欢 1 ; 胡奇林 1 ;
作者机构: 1.广东省农业科学院动物卫生研究所
关键词: 鸭坦布苏病毒;产蛋下降综合征病毒;二重PCR
期刊名称: 广东畜牧兽医科技
ISSN: 1005-8567
年卷期: 2015 年 40 卷 01 期
页码: 29-33
摘要: 参考Gen Bank上已发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)NS5基因序列和产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列,分别设计了检测DTMUV和EDSV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为242 bp和181 bp。通过退火温度及引物浓度的优化,建立了针对这两种病毒的二重PCR检测方法。特异性试验结果表明,该方法可以同时检测DTMUV和EDSV,且不与鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、番鸭呼肠孤病毒、小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒以及大肠杆菌的核酸发生交叉反应;敏感性试验表明,该方法对DTMUV的最低检出限为590个拷贝,对EDSV的最低检出限为3 260个拷贝;该方法重复性良好,对不同批次的样品扩增效果良好。通过检测两种病毒感染的阳性病料各10份,结果显示,该二重PCR检测方法对阳性样品的检出率可达100%。这表明该方法可以用于鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒的检测。
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