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鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒二重PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 孙敏华 1 ; 李林林 1 ; 董嘉文 1 ; 袁建丰 1 ; 邝瑞欢 1 ; 胡奇林 1 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院动物卫生研究所

关键词: 鸭坦布苏病毒;产蛋下降综合征病毒;二重PCR

期刊名称: 广东畜牧兽医科技

ISSN: 1005-8567

年卷期: 2015 年 40 卷 01 期

页码: 29-33

摘要: 参考Gen Bank上已发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)NS5基因序列和产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列,分别设计了检测DTMUV和EDSV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为242 bp和181 bp。通过退火温度及引物浓度的优化,建立了针对这两种病毒的二重PCR检测方法。特异性试验结果表明,该方法可以同时检测DTMUV和EDSV,且不与鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、番鸭呼肠孤病毒、小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒以及大肠杆菌的核酸发生交叉反应;敏感性试验表明,该方法对DTMUV的最低检出限为590个拷贝,对EDSV的最低检出限为3 260个拷贝;该方法重复性良好,对不同批次的样品扩增效果良好。通过检测两种病毒感染的阳性病料各10份,结果显示,该二重PCR检测方法对阳性样品的检出率可达100%。这表明该方法可以用于鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒的检测。

  • 相关文献

[1]鸭坦布苏病毒、产蛋下降综合征病毒和H9亚型禽流感病毒三重荧光定量PCR检测方法的建立. 孙敏华,李林林,董嘉文,刘志成,孙俊颖,沈海燕,张建峰,张春红. 2017

[2]鸭坦布苏病毒江门株的分离鉴定及其E基因系统进化分析. 孙敏华,胡奇林,董嘉文,李林林,袁建丰,郭建伟,安贺佳. 2012

[3]实时荧光技术在鸭坦布苏病毒RT-LAMP检测方法中的应用. 董嘉文,孙敏华,李林林,袁建丰,胡奇林,张建峰. 2015

[4]检测鸭坦布苏病毒NS1抗体ELISA方法的建立. 孙敏华,郭建伟,李林林,董嘉文,邝瑞欢,吴玄光,张建峰,胡奇林,张春红. 2017

[5]鸭坦布苏病毒NS1基因的克隆及原核表达. 郭建伟,董嘉文,孙敏华,李林林,袁建峰,吴玄光,胡奇林. 2013

[6]鸭坦布苏病毒E蛋白及其结构域Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对DEF细胞周期与凋亡的影响. 汪婷,汪威,徐欢,殷世彬,孙敏华,江心月,徐静,汪招雄. 2023

[7]鸭坦布苏病毒JM株E蛋白的截断表达及间接ELISA方法的建立. 董嘉文,李林林,孙敏华,张建峰,邝瑞欢,胡奇林,张春红. 2017

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