文献类型： 中文期刊
作者： 朱向东 1 ; 欧阳伟 2 ; 王晓丽 3 ; 夏兴霞 3 ;
作者机构： 1.兽医生物技术国家重点实验室
2.南京农业大学动物医学院
3.江苏省农业科学院兽医研究所
关键词： 鸡传染性法氏囊病病毒;VP2;密码子优化;表达
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2013 年 03 期
页码： 271-276
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了提高鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因在大肠杆菌中的表达量,分析近期引起安徽免疫失败IBD病例中分离的强毒分离株AH1株的VP2基因,发现有49个稀有密码子,其中编码Arg(R)的有16个,编码Gly(G)的有6个。编码精氨酸的AGG(AGA)2个稀有密码子紧密相连(R区),另外还有2个相对比较集中的GGG密集区(G区)。根据大肠杆菌密码子使用频率对IBD强毒分离株(AH1株)VP2基因进行改造并合成优化基因,命名为mVP2。将mVP2基因分别克隆到pET-32a及pBV220原核表达质粒,构建了含密码子优化型IBDV VP2基因的原核表达质粒pET32-VP2和pBV220-VP2。SDS-PAGE结果显示,优化基因mVP2在大肠杆菌中的表达较野生型基因有十分显著的提高。Western-blot检测到目的蛋白能够与鸡抗IBDV超免疫血清反应。本研究为开展VP2基因结构与功能的深入研究及IBD免疫预防和快速诊断奠定了理论基础。
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