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单头灰飞虱体内两种水稻病毒的双重一步法RT-PCR检测

文献类型： 中文期刊

作者： 李俊敏 1 ; 周燕茹 1 ; 孙宗涛 1 ; 王旭 1 ; 谢礼 1 ; 陈剑平 1 ;

作者机构： 1.浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地

关键词： 灰飞虱;水稻条纹病毒;水稻黑条矮缩病毒;RT-PCR

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2014 年 26 卷 02 期

页码： 378-383

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 灰飞虱传播的水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)和水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)是危害我国水稻生产最主要的2种病毒,建立灰飞虱体内RSV和RBSDV快速、可靠的检测方法是水稻生产中的重要问题。本研究根据RSV RNA3和RBSDV S10序列分别设计了2个病毒的特异性引物,通过退火温度和PCR循环数等条件的优化,建立了灰飞虱体内RSV和RBSDV快速鉴定的双重一步法RT-PCR体系。对一步法和两步法RT-PCR检测结果进行比较,表明2种方法均能准确有效鉴定灰飞虱体内的2种病毒,且两步法的检测效果略好于一步法。而灵敏度实验表明一步法RT-PCR可以从0.005 ng·μL-1的灰飞虱RNA初始模板中准确检测到病毒,完全满足单头灰飞虱体内病毒检测的需要。应用本研究建立的双重一步法RT-PCR体系对200头获毒灰飞虱样品中的RSV和RBSDV进行了检测,结果进一步证实了此方法的稳定性和可靠性。

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