文献类型： 中文期刊
作者： 王敏 1 ; 那冬晨 1 ; 姬虎太 1 ; 张定一 1 ;
作者机构： 1.山西省农业科学院小麦研究所;山西师范大学生命科学院
关键词： 小麦;DNA提取;简便快速
期刊名称： Agricultural Science & Technology
ISSN： 1009-4229
年卷期： 2009 年 05 期
页码： 40-41+81
摘要： [目的]寻求少量、快速提取小麦幼叶DNA的方法。[方法]以小麦幼叶(只要是健康的绿叶,老叶也可)为试验材料,用改良的CTAB法小量快速提取转基因小麦总DNA。具体步骤为:①直接用已灭菌的1.5ml离心管夹取小麦叶片(无需称量),然后在液氮中快速冷冻后用玻璃棒研磨成细粉(研磨直接在离心管中进行,不必先在研钵中研磨然后再转移到离心管里,能够有效减少材料损失),加入600μl预热(65℃)的2%CTAB提取缓冲液,快速振荡摇匀。置于65℃的水浴锅中温育30min,期间温和混匀几次。②取出离心管,冷却至室温,加入600μl氯仿:异戊醇(24:1)充分混匀,于4℃下12000r/min离心8min(只抽提1次)。③取上清,加入等体积预冷的异丙醇,缓慢混匀,至有絮状DNA析出,-20℃放置30min以上。④4℃下12000r/min离心8min。弃上清液,将沉淀用700μl70%乙醇清洗2次,离心,弃乙醇,室温下挥发乙醇,加入适量ddH2O或0.1×TE溶解沉淀(DNA),-20℃保存。所提取的DNA以0.8%琼脂糖凝胶电泳检测。[结果]改良的CTAB法提取小麦基因组DNA所提取的DNA纯度高、无降解现象,适用于进行常规PCR扩增,并且需要材料量少、成本低,还可缩短操作周期、节省时间。[结论]该研究为小麦DNA的提取提供了一种所需材料量少、简便、快速的方法。
- 相关文献
[1]快速小量提取小麦叶片DNA的一种简易方法. 王敏,那冬晨,姬虎太,张定一. 2009
[2]甘薯DNA的小量快速提取. 张换样,李静,南芝润,焦改丽. 2009
[3]蝶类干标本DNA的提取及RAPD-PCR扩增. 张敏,张建珍,郭亚平,曹天文,马恩波. (Mis
[4]高质量枣树基因组DNA提取方法的研究. 王永康,王永勤,田建保,樊新平,李登科,隋串铃,黄丛林. 2005
[5]PEX法提取植物组织DNA. 雷海英,孙毅,仪治本,段永红,王志军. 2010
[6]一种简便实用的植物总DNA提取方法. 王景雪,孙毅,高武军. 2000
[7]应用SSR标记技术鉴定强盛16号玉米单交种纯度. 武岩军,许晶,车星星. 2012
[8]玉米种子纯度鉴定中DNA提取方法的比较研究. 闫米格,许晶,骈跃斌,原佳敏,李素玲,张君捷. 2011
[9]高质量枣树基因组DNA提取方法的研究. 李登科,黄丛林,田建保,王永康,王永勤. 2005
[10]高质量枣基因组DNA提取方法. 王永康,王永勤,田建保,樊新平,李登科,隋串玲,黄丛林. 2006
[11]SSR标记技术在玉米品种纯度鉴定上的利用研究. 李素玲,柴美清,张君捷,杨宇,尚春树. 2007
[12]应用SSR标记技术鉴定玉米杂交种的纯度. 李素玲,张君捷,柴美清,尚春树. 2007
[13]小麦新品种(系)对麦长管蚜抗性的鉴定. 屈会选,党建友,程麦风,屈非,连晋,谢咸升. 2011
[14]簇毛麦高分子量麦谷蛋白亚基导入小麦研究. 曹亚萍,张瑞奇,范绍强,陈佩度,张风琴,周元成,张姝敏. 2010
[15]饲粮兼用多年生小麦培育与多年生特性两重性的研究. 孙玉,孙善澄,刘少翔,闫贵云,郭庆. 2011
[16]水、旱交叉选育抗旱高产稳产小麦新品种的研究. 孙美荣,李岩华,张俊灵,申书珍,王节之. 2001
[17]山西省中部不同水肥条件下小麦产量构成因素及育种方向研究. 温辉芹,张立生,李生海,程天灵,郭明慧. 2001
[18]小麦抗BYDV基因遗传研究. 王娟玲,曹亚萍,张明义,宁东贤. 2002
[19]小麦F1籽粒Glu-1基因的共显、畸变及剂量效应. 潘幸来,潘前颖,许钢垣,张贵云,谢三刚,王道文. 2001
[20]液相色谱-串联质谱法测定小麦、麦秸和土壤中氟唑磺隆及其代谢物残留. 秦曙,乔雄梧,王霞,龚勇,李振. 2008
作者其他论文 更多>>
-
玉米胚大小及其相关性状的QTL分析
作者：李晓伟;马海林;张人予;王敏;杨小红;李建生
关键词：玉米;胚大小;籽粒大小;油分性状;QTL
-
节水多抗高产小麦品种品育8012的选育及配套栽培技术
作者：曹勇;王敏;马小飞;李晓丽;姜兰芳;郝建宇;姬虎太
关键词：冬小麦;品育8012;选育;节水;高产
-
不同产地谷子籽粒营养品质与食味品质的比较研究
作者：王瑞;李齐霞;祁丽婷;王敏;孙万荣;邬志远;李中青
关键词：谷子;籽粒;产地;生长环境;营养品质;食味品质
-
国审抗旱高产小麦新品种品育8155的选育
作者：马小飞;高宇;王敏;曹勇;李晓丽;姜兰芳;郝建宇;张定一;姬虎太
关键词：小麦;国审;品育8155;选育
-
不同温湿条件下中筋小麦粉淀粉糊化特性的变化
作者：曹勇;姜兰芳;王敏;马小飞;李晓丽;郝建宇;姬虎太
关键词：小麦粉;储藏;糊化特性
-
微喷灌水肥一体化下磷钾肥减量分期施用对小麦产量和养分利用的影响
作者：张晶;党建友;裴雪霞;张定一;王姣爱;程麦凤
关键词：微喷灌水肥一体化;磷钾肥减施;小麦;产量;氮磷钾积累
-
晚熟鲜食葡萄新品种'翠香宝'
作者：唐晓萍;马小河;董志刚;谭伟;李晓梅;赵旗峰;王敏;谭敏
关键词：葡萄;鲜食;晚熟
