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西瓜根系蛋白质双向电泳体系的建立及优化

文献类型: 中文期刊

作者: 张曼 1 ; 羊杏平 1 ; 徐锦华 1 ; 刘广 1 ; 姚协丰 1 ; 李苹芳 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院蔬菜研究所

关键词: 西瓜根系;蛋白质组;双向电泳

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2015 年 30 卷 S1 期

页码: 51-54

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立高效、稳定的西瓜根系蛋白质双向电泳技术体系,对西瓜根系蛋白质样品等电聚焦(IEF)条件、样品上样量、IPG胶条p H值范围、染色方法等参数进行优化。结果表明,采用TCA/丙酮法提取西瓜根系总蛋白,裂解液组成为7 mol/L Urea、2 mol/L Thouirea、4%CHAPS(m/V)、1%Cocktail(V/V)、65 mmol/L DTT、2%p H值4~7 IPG Buffer,上样量为800μg,p H值4~7 IPG(13 cm)胶条、IEF条件为48 000 Vh,分离胶浓度为12.5%,CBB-R250染色时,可获得分辨率高、重复性好的双向电泳图谱,该技术条件为适合西瓜根系蛋白分离的较优双向电泳体系。

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