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牛Sry启动子调控序列的鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 韩凤桐 1 ; 林秀坤 2 ; 刘娣 3 ; 吴宁 2 ; 廖冰 2 ;

作者机构： 1.哈尔滨工业大学

2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

3.黑龙江省农业科学院

关键词： 牛;Sry;核心启动子;双荧光素酶报告基因分析系统

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2010 年 43 卷 14 期

页码： 2996-3004

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】Sry是大多数哺乳动物雄性性别发育的决定基因,但人们仍未找到其表达的调控规律,本试验对牛Sry5′端调控序列作了初步的研究,为深入研究牛Sry的表达调控奠定了基础。【方法】克隆牛Sry5′端侧翼1056bp长的DNA序列,利用生物信息学方法对这一区域内潜在的转录起始位点进行了预测,并构建了10个不同长度的缺失牛Sry5′部分侧翼序列的报告基因载体;进一步分离了胎牛生殖嵴,进行生殖嵴细胞的原代培养,并对胎牛生殖嵴细胞进行了性别和特征鉴定;最后利用荧光素酶双报告基因分析系统,在生殖嵴细胞内检测了牛Sry核心启动子区域的位置。【结果】体外培养的生殖嵴细胞可以表达雄性生殖嵴细胞的特征基因Sry、Sox9、Sf-1和Dax1,牛Sry5′端-93、-419和-722处存在3个潜在的转录起始位点(TSS),-599—-565区域35bp内存在控制Sry基础转录活性的顺式调控元件,其中存在多个潜在的转录因子结合位点。【结论】牛Sry5′端UTR区-599—-565bp区域35bp存在部分调控序列。

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