文献类型： 中文期刊

作者： 李学伍 ¹ ; 陈辉 ¹ ; 杨艳艳 ¹ ; 闫玉河 ¹ ; 郭成留 ¹ ; 邓瑞广 ¹ ; 郭军庆 ¹ ; 李青梅 ¹ ; 张改平 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 纤毛蛋白K88、K99,表达,特性

期刊名称： 中国畜禽传染病

ISSN： 1008-0589

年卷期： 1998 年 03 期

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收录情况： 北大核心

摘要： 应用ＬＢ培养基３７℃、１５０ｒ／ｍｉｎ振荡培养１７小时，室温４０００ｒ／ｍｉｎ，离心３０分钟，收集沉淀菌体，用ＰＢＳ离心洗涤一次，沉淀物重悬于适量的ＰＢＳ中。三等分菌体悬浮液分别用超声波、冻融、热休克等方法处理后，室温８０００ｒ／ｍｉｎ离心３０分钟，取上清液加入饱和硫酸铵４℃过夜，沉淀蛋白经透析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０过柱纯化。应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、凝胶扫描测定Ｋ８８、Ｋ９９蛋白的分子量及浓度，双向免疫扩散、ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ试验测定其抗原性。结果表明，热休克法分离纤毛抗原是最好的方法，从Ｃ株Ｅ株分离得到的纤毛抗原，在分子量大小及对单抗亲和反应能力方面没有明显的差异。