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猪乙型脑炎病毒Ⅰ、Ⅲ型的RT-LAMP检测方法建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 李海洋 1 ; 殷秀辰 1 ; 饶柏钟 1 ; 刘惠莉 1 ;

作者机构: 1.上海农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 猪;乙型脑炎病毒;环介导等温扩增;诊断

期刊名称: 畜牧与兽医

ISSN: 0529-5130

年卷期: 2015 年 47 卷 05 期

页码: 26-30

收录情况: 北大核心

摘要: 参考Gen Bank中猪乙型脑炎病毒(JEV)Ⅰ型和Ⅲ型毒株的E基因序列,通过比对分析,选取8个保守区域设计了6条引物,经条件优化及临床样品验证,本研究建立了能同时检测JEVⅠ型和Ⅲ型毒株E基因的RT-LAMP方法。该方法的最低检测灵敏限度为15 copies,具有较好的特异性,对猪常见病原如猪流感病毒(SIV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),猪细小病毒(PPV)和伪狂犬病病毒(PRV)等均没有特异性扩增。与RT-PCR检测方法相比,其灵敏性高10倍。用本研究建立的RT-LAMP方法检测来自屠宰场的1 500份猪血清,阳性检出率为0.4%,与RT-PCR吻合率达100%,表明本试验建立的RT-LAMP方法适用于Ⅰ、Ⅲ基因型JEV的快速、批量筛检,为JEV感染的流行病学调查提供了必要的技术手段。

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