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诺氟沙星ELISA试剂盒研制与性能鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 邢广旭 1 ; 王国栋 2 ; 胡骁飞 3 ; 王方雨 3 ; 邓瑞广 3 ; 张改平 3 ;

作者机构： 1.河南农业大学牧医工程学院

2.安阳工学院

3.河南省农业科学院免疫学重点实验室

关键词： 诺氟沙星;单克隆抗体;ELISA;试剂盒

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2013 年 46 卷 16 期

页码： 3470-3477

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】建立诺氟沙星(norfloxacin,Nor)免疫检测试剂盒。【方法】基于所制备的诺氟沙星单克隆抗体,通过矩阵法筛选最佳抗体工作浓度和二抗工作浓度,建立诺氟沙星间接竞争ELISA试剂盒(Nor-kit),并对其性能进行了鉴定和确证。【结果】Nor-kit的平均IC50为5.18μg.L-1,灵敏度为0.31μg.L-1,检测限为1.00μg.L-1。试剂盒除了和诺氟沙星反应外,还和同系物中的培氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、洛美沙星及恶喹酸有不同程度的交叉反应。奶样中回收率平均为103.23%,变异系数(CV)为9.33%。3个不同批次试剂盒的测定结果中,批内变异系数小于10%,且批间变异系数也小于10%;在4℃保存条件下,试剂盒可以保存6个月而质量不变。奶样添加回收试验,试剂盒与LC-MS/MS测定结果没有显著差异(P≥0.05);而且检测实际生产中鲜奶样时,试剂盒与LC-MS/MS测定结果也无显著差异(P≥0.05)。【结论】本研究成功研制出灵敏、特异、简便的诺氟沙星残留检测ELISA试剂盒。

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