文献类型： 中文期刊

作者： 刘奕君 ¹ ; 闫伟 ² ; 龙丽坤 ² ; 马月 ² ; 何禹璇 ² ; 赵宁 ² ; 李飞武 ¹ ; 张斯童 ¹ ;

作者机构： 1.吉林农业大学生命科学学院

2.吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

关键词： 转基因;筛选标记;数字PCR;FMV 35S;定量检测

期刊名称： 食品科学

ISSN： 1002-6630

年卷期： 2024 年 011 期

页码： 278-284

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 以含有FMV 35S标记基因的大豆转化体MON87705为材料，利用实时聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction,real-time PCR）和数字PCR（digital PCR,dPCR）技术，建立一种转基因作物的定量检测方法。通过real-time PCR法对扩增体系测试，建立的检测方法对FMV 35S标记基因具有高度特异性；利用双重微滴式dPCR进行定量检测参数的测定，结果表明：在基因组DNA 0.005～20 ng/μL质量浓度范围，靶标基因的测量拷贝数与理论拷贝数具有良好的线性关系；dPCR方法对FMV 35S标记基因的检出限可达到5 copies，定量限为0.1%。利用两个dPCR平台，对不同含量的转基因作物的盲样进行测定，内标准基因和外源特异性片段的双重、三重测定，均获得准确的定量结果，数据可靠，再现性良好。因此本研究建立的基于筛选标记基因FMV 35S的转基因dPCR定量检测方法在满足转基因成分定量检测标准的参数要求的同时，能够进一步提高检测效率，可为转基因作物成分定量提供一种准确、简便的检测技术。