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转基因耐除草剂玉米LW2-1转化体特异性数字PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 龙丽坤 1 ; 杨帆 1 ; 闫伟 1 ; 何禹璇 1 ; 赵宁 1 ; 邢珍娟 1 ; 董立明 1 ; 马月 1 ; 李飞武 1 ;

作者机构: 1.吉林省农业科学院(中国农业科技东北创新中心)农业质量标准与检测技术研究所

关键词: 转基因玉米;LW2-1;微滴式数字PCR;定量检测

期刊名称: 玉米科学

ISSN: 1005-0906

年卷期: 2025 年 33 卷 011 期

页码: 28-36

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 基于微滴式数字PCR平台,开发一种针对转基因玉米LW2-1转化体的二重微滴式数字PCR定量检测方法。通过设计针对LW2-1特异性插入片段序列的引物和探针,优化其工作浓度和退火温度,建立了最佳反应条件;对方法的特异性、动态线性范围、检测限、定量限及重复性进行参数的验证。结果表明,该方法具有优良的特异性,线性范围覆盖20~40 000拷贝的LW2-1基因组DNA,检测限低至10拷贝,定量限达到0.1%。在对不同含量转基因玉米LW2-1样品的ddPCR定量分析中,与实时荧光定量PCR相比,该方法表现出更高的灵敏度、稳定性和准确性,适用于无需依赖标准物质的精确转基因成分定量分析。

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