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高羊茅FaGI基因克隆、表达及启动子分析

文献类型: 中文期刊

作者: 舒健虹 1 ; 罗维 2 ; 路雪萍 3 ; 牟琼 1 ; 吴佳海 2 ; 王小利 1 ;

作者机构: 1.贵州省农业科学院草业研究所

2.贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室

3.贵州大学生命科学学院

关键词: 高羊茅;高羊茅GIGANTEA (FaGI)基因;启动子克隆;表达分析

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1674-7968

年卷期: 2021 年 010 期

页码: 1936-1948

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: GI (GIGANTEA)是节律相关基因,在植物控制节律输出和开花调控中具有重要作用。为探索GI基因在高羊茅(Festuca arundinacea)中的生物学功能,本研究运用cDNA末端快速扩增法(rapid amplification of cDNA ends, RACE)克隆和染色体步移法扩增得到该基因序列和启动子序列,并对其进行生物信息学分析。序列分析表明,FaGI基因(GenBank No. MZ540915)序列全长3 869 bp,其开放阅读框为3 447 bp,编码1 149个氨基酸。启动子序列2 371 bp,有CURECORECR、GT1CONSENSUS、LTRE1HVBLT49和MYB识别位点多个顺式作用元件。系统进化树表明,FaGI基因编码的蛋白与草甸羊茅(Festuca pratensis)、黑麦草(Lolium perenne)、黑麦(Secale cereale)和小麦(Triticum aestivum)等禾本科植物同源蛋白的进化关系比较近。亚细胞定位显示其定位在细胞核,说明该蛋白可能在细胞核中发挥作用。荧光定量分析不同光照处理和不同发育阶段下的表达模式。结果显示,FaGI基因的表达受光周期和生物钟的调控,不同发育时期其表达量不同,苗期的表达量最高,进入生殖生长阶段其表达量下降。构建p1300-FaGI过表达载体转化拟南芥(Arabidopsis thaliana),结果显示,FaGI过表达拟南芥能上调AtCCA1(CIRCADIAN CLOCK ASSOCIATED 1)和AtTOC1 (TIMING OF CAB EXPRESSION 1)表达,下调AtFT(FLOWERING LOCUS T)和AtCO (CONSTANS)表达。该研究结果为后续验证高羊茅FaGI基因功能提供理论依据。

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