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猪丁型冠状病毒重组N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 逄凤娇 1 ; 俞正玉 2 ; 何孔旺 2 ; 徐向伟 2 ; 张柏猛 2 ; 郭容利 2 ; 温立斌 2 ; 袁万哲 2 ; 姜平 2 ; 李彬 3 ;

作者机构: 1.南京农业大学动物医学院;江苏省农业科学院兽医研究所;河北农业大学动物医学院

2.;南京农业大学动物医学院;江苏省农业科学院兽医研究所;河北农业大学动物医学院

3.;南京农业大学动物医学院;江苏省农业科学院兽医研究所;河北农业大学动物医学院;

关键词: 猪丁型冠状病毒;N蛋白;原核表达;间接ELISA

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2017 年 06 期

页码: 461-465

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 猪丁型冠状病毒(PDCoV)是2014年检测出的一种新型猪源肠道冠状病毒,对养殖业造成严重的经济损失。为建立快速检测PDCoV的血清学方法,本研究以原核表达的PDCoVN重组蛋白为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种PDCoV重组N蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,原核表达的PDCoV重组N蛋白约为28ku,westernblot证实表达蛋白具有良好的反应原性;以其作为包被抗原建立的PDCoV抗体间接ELISA方法仅对PDCoV血清检测为阳性,与猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪繁殖与呼吸系统综合征病毒等7种主要猪源病毒阳性血清均无特异性反应,具有良好的特异性。该方法检测灵敏度较高、重复性好,批内和批间重复性变异系数均小于10%;采用该ELISA方法对我国2014年~2016年间采集的不同地区猪场的100份临床血清样品进行了检测,阳性率高于45.9%,表明我国猪群中存在PDCoV感染。本实验建立的ELISA方法可以用于检测临床样品中的PDCoV抗体,是PDCoV流行病学调查的一种有效工具,对该病的防控具有重要意义。

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