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DNA的不同提取方法对转基因产品定值的影响

文献类型: 中文期刊

作者: 王鹏飞 1 ; 蒋滢 1 ; 徐俊锋 2 ; 汪小福 2 ; 陈笑芸 2 ; 缪青梅 2 ; 李玥莹 1 ;

作者机构: 1.沈阳师范大学化学与生命科学学院

2.浙江省农业科学院农产品质量标准研究所

关键词: 克螟稻;荧光定量PCR;提取方法

期刊名称: 沈阳师范大学学报(自然科学版)

ISSN: 1673-5862

年卷期: 2014 年 32 卷 02 期

页码: 273-276

摘要: 国内外非常重视转基因产品的检测工作,主要依赖于DNA的PCR方法进行检测,其检测结果可靠、稳定、灵敏度较高。尤其在转基因产品的定值实验中,荧光定量PCR的应用起到重要的作用,但是DNA的质量是保证荧光定量PCR定值准确的关键。实验以100%的克螟稻为材料,用CTAB法、商品化的Promega、Qiagen以及TIANGEN提取试剂盒,分别提取克螟稻基因组DNA,经过核酸蛋白分析仪初步测定浓度、纯度以及离子浓度后,分别以水稻内源基因PLD和克螟稻特异性转化体引物及探针实施荧光定量PCR实验,以100%克螟稻为盲样实施定值,来确定一种更适合荧光定量PCR定值实验的DNA提取方法,最终确定Qiagen和TIANGEN提取试剂盒满足荧光定量PCR对100%的克螟稻标准物质定值实验的要求。

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