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应用抑制差减杂交法分离玉米幼苗期叶片土壤干旱诱导的基因

文献类型: 中文期刊

作者: 李会勇 1 ; 黄素华 1 ; 赵久然 2 ; 王凤格 2 ; 张中保 1 ; 毛毅辉 1 ; 王秀堂 1 ; 石云素 1 ; 宋燕春 1 ; 王国英 1 ; 黎裕 1 ; 王天宇 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院作物科学研究所

2.北京市农林科学院玉米研究中心

关键词: 玉米;干旱诱导;抑制差减杂交法;耐旱基因

期刊名称: 中国农业科学

ISSN: 0578-1752

年卷期: 2007 年 40 卷 05 期

页码: 882-888

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】分离土壤干旱胁迫条件下玉米幼苗期叶片诱导表达的基因。【方法】本研究利用抑制差减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)的方法,以耐旱自交系CN165为材料,构建了土壤干旱胁迫下玉米幼苗叶片的正向抑制差减cDNA文库。【结果】在这个文库中,随机挑取了672个阳性克隆,并进行PCR验证,对所有的单克隆进行了测序。得到了598个有效序列,经过EST聚类分析后,共得到了80个uniESTs。其中57个为contigs。23个为singlets。BLASTN的结果表明,所有的uniESTs都可以在玉米的核酸数据库中找到同源序列。BLASTX的结果表明:68个uniESTs和已知功能的蛋白有高度的相似性,8个uniESTs为未知功能蛋白和假定蛋白,4个uniESTs没有蛋白质的相似性。【结论】在这个cDNA文库中发现了大量抗旱相关的基因,这些基因涉及到植物代谢的多种途径。

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