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检测兔出血症病毒抗体间接ELISA方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 李超美 1 ; 王芳 1 ; 蔡少平 1 ; 任雪枫 2 ; 胡波 1 ; 范志宇 1 ; 徐为中 1 ; 何孔旺 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.江苏省动物疫病预防控制中心

关键词: 兔出血症病毒;VP60;间接ELISA

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2010 年 26 卷 03 期

页码: 546-550

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立检测兔出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法,应用杆状病毒表达系统表达的RHDV VP60包被酶标板,经间接ELISA的最佳反应条件优化试验确定:抗原的包被浓度为4.62μg/ml,标准阴、阳性血清稀释度为1∶200,封闭液选用2%明胶;羊抗兔IgG最佳稀释度为1∶4 000。阻断试验、特异性试验、敏感性试验、重复性试验结果显示,该方法具有较高的特异性、敏感性和重复性。用建立的ELISA方法与血凝抑制试验对临床血清样品进行检测,结果显示,ELISA与HI检测兔血清的RHDV抗体阳性率分别为84.7%(955/1 127)和76.0%(857/1 127),符合率为91.3%。该方法的建立为检测RHDV抗体提供了一种安全、特异、敏感、快速、操作简便经济的检测方法,为兔出血症免疫监测和预防控制提供了科学的技术手段。

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