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中华鲟胚胎细胞的冷冻保存及其核移植

文献类型： 中文期刊

作者： 余来宁 1 ; 危起伟 2 ; 张繁荣 1 ; 杨东 1 ; 姚雁鸿 2 ; 刘红艳 1 ;

作者机构： 1.江汉大学医学与生命科学学院

2.中国水产科学研究院长江水产研究所

关键词： 中华鲟;胚胎细胞;冷冻保存;核移植

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2007 年 31 卷 04 期

页码： 431-436

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了保存濒危鱼类中华鲟种质资源,对其囊胚细胞和原肠细胞进行了冷冻保存和核移植试验。用二甲亚砜(DMSO)、1,2-丙二醇(PG)、羟乙基淀粉(HES)3种抗冻剂,配制4种冷冻保护液:CP1(12%D)、CP2(10%P)、CP3(8%D+6%E)、CP4(7%P+6%E),冷冻细胞存活率分别为47.4%±4.7%、64.4%±3.6%、54.7%±4.7%、76.7%±5.7%,CP4保存效果最好,说明添加非渗透型抗冻剂羟乙基淀粉能提高冷冻保存细胞的存活率。比较了两种冷冻方法,发现细胞在-7℃平衡30min之后直接投入液氮的一步冷冻降温法是可行的。对不同发育时期的胚胎细胞冷冻存活率进行了比较,结果表明原肠细胞冷冻存活率(64.4%±11.8%)明显比囊胚细胞的(57.1%±11.2%)高(P<0.05)。用冷冻复苏后的囊胚细胞和原肠细胞作供体,以中华鲟未受精卵作受体进行核移植,各移植了469和392枚卵,分别获得了5尾和2尾克隆鱼,核移植成功率分别为1.1%和0.5%。表明可通过冷冻保存胚胎细胞结合核移植技术保存鱼类种质资源。

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