文献类型: 中文期刊
作者: 于永生 1 ; 张立春 2 ; 罗晓彤 2 ; 刘铮 2 ; 张树敏 2 ;
作者机构: 1.中国农业科技东北创新中心
2.吉林省农业科学院畜牧分院
关键词: 猪α-actin;线虫ω-3脂肪酸去饱和酶;肌肉特异表达载体;体外验证
期刊名称: 中国生物工程杂志
ISSN: 1671-8135
年卷期: 2011 年 31 卷 07 期
页码: 27-31
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 根据猪α-actin基因已知DNA序列设计合成了两个特异性引物,以猪基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到α-actin 5'调控序列,然后与线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因cDNA、去除CMV启动子的表达载体pcDNA3.1连接构成肌肉特异性表达载体pcDNA3.1-AF,小鼠股四头肌注射该重组载体,RT-PCR检测证明其表达有效性。PCR扩增出1 815 bp的特异性片段,DNA测序结果证明该克隆片段与α-actin 5'端调控区序列相比具有很高的一致性,含有肌肉特异性元件;小鼠股四头肌注射重组载体,RT-PCR显示肌肉内ω-3脂肪酸去饱和酶基因得到有效转录。
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