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黑曲霉纤维二糖水解酶基因cbhA在毕赤酵母中异源表达

文献类型： 中文期刊

作者： 秦慧彬 1 ; 李梦菲 2 ; 杨洪江 3 ;

作者机构： 1.工业微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院;山西省农业科学院农作物品种资源研究所农业部黄土高原基因资源与种质创制重点实验室杂粮种质资源发掘与遗传改良山西省重点实验;诺维信(中国)投资有限公司

2.;工业微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院;山西省农业科学院农作物品种资源研究所农业部黄土高原基因资源与种质创制重点实验室杂粮种质资源发掘与遗传改良山西省重点实验;诺维信(中国)投资有限公司

3.;工业微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院;山西省农业科学院农作物品种资源研究所农业部黄土高原基因资源与种质创制重点实验室杂粮种质资源发掘与遗传改良山西省重点实验;诺维信(中国)投资有限公司;

关键词： 黑曲霉;纤维二糖水解酶A;毕赤酵母;异源表达

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2017 年 04 期

页码： 330-336

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]对黑曲霉纤维二糖水解酶cbhA基因进行了克隆和在毕赤酵母中的真核表达。[方法]采用PCR方法扩增黑曲霉纤维二糖水解酶A(Cellobiohydrolase A,CBHA)基因,获得的DNA序列与cbhA基因表现出高度相似,推导出的氨基酸序列与真菌CBHA酶也高度相似,属于糖基水解酶第7家族。将扩增得到的cbhA基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,与α-因子信号肽序列形成融合蛋白,进一步通过电转化方法将线性化质粒p PIC9K-cbhA转化至毕赤酵母GS115菌株进行表达。[结果]在甲醇诱导下,重组菌株CMC比酶活力是对照的2.5倍,SDS-PAGE分析结果也确认了cbhA基因在重组菌株GS115/p PIC9K-cbhA中的表达。对该酶性质的分析表明,重组CBHA酶水解CMC底物最适p H值为5.0,最适温度为55℃。[结论]黑曲霉纤维二糖水解酶基因cbhA的克隆和其真核表达工程菌株的构建,为获得纤维二糖水解酶A高产菌株,实现纤维素酶多组分的人工组装奠定了基础。

  • 相关文献

[1]盐碱地柠条根围土中黑曲霉的分离鉴定及解磷能力测定. 张丽珍,樊晶晶,牛伟,李涛,吴荣海,金益杰,鹿茸. 2011

[2]基于DNA高通量测序分析生料酿醋过程中的真菌多样性. 张永杰,崔宁波,张丽珍,甄晓君,柳青山. 2020

[3]白腐真菌和黑曲霉对甘蔗渣降解的影响研究. 张变英,王士长,王芳,上官明军,张红岗,樊爱芳,陈泽. 2006

[4]黑曲霉改性沼渣对水中Pb(Ⅱ)的生物吸附. 赵晓婵,赵博玮,汪素芳,李永平,岳秀萍,洪坚平. 2019

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