文献类型： 中文期刊

作者： 王健霖 ¹ ; 田兴苗 ¹ ; 王景松 ² ; 戴莎莎 ¹ ; 郭亚男 ³ ; 何生虎 ¹ ; 李继东 ¹ ;

作者机构： 1.宁夏大学

2.宁夏大学动物科技学院

3.宁夏农林科学院动物科学研究所

关键词： 牛支原体;重组酶聚合酶扩增;可视化;检测方法

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2024 年 36 卷 008 期

页码： 1811-1819

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一种对牛支原体高效、快捷的可视化重组酶聚合酶扩增（LFD-RPA）临床诊断方法，以牛支原体uvrc基因序列为靶基因，设计特异性引物和探针，通过筛选引物和探针、优化反应条件，并通过灵敏度、特异性、重复性和临床样本检测试验进行验证。结果显示，该试验建立的牛支原体LFD-RPA最佳引物为F2/R2,最佳反应条件为39℃、 25 min;检测灵敏度可达2.08 copies·μL^-1,是普通PCR灵敏度的100倍；与滑液囊支原体、沙门氏菌、绵羊肺炎支原体、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和产气荚膜梭菌之间无交叉反应；重复性稳定；对50份鼻拭子样本进行检测，阳性率为26%,与我国行业标准PCR检测方法的符合率为89.6%。该试验成功建立了牛支原体LFD-RPA检测方法，该方法具有操作简便、快速、高效、敏感等优点，为牛支原体的临床快速诊断提供了技术支撑。