文献类型： 中文期刊

作者： 曹金博 ¹ ; 胡骁飞 ¹ ; 王耀 ² ; 李燕虹 ¹ ; 曹夕丹 ² ; 邢云瑞 ¹ ; 孙亚宁 ¹ ; 邓瑞广 ¹ ; 张改平 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

2.河南科技大学食品与生物工程学院

关键词： 土霉素;完全抗原;多抗血清;ELISA

期刊名称： 食品与机械

ISSN： 1003-5788

年卷期： 2019 年 35 卷 009 期

页码： 77-83

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝胶电泳鉴定其偶联效果,然后将完全抗原免疫BLAB/c小鼠获得多抗血清(pAb)并对其免疫学特性进行鉴定,通过优化条件建立OTC间接竞争ELISA检测方法.结果表明,偶联效果良好,免疫的4只小鼠多抗血清效价均达到1︰12800;4只小鼠多抗血清均有抑制效果,其中2号小鼠产生的多抗血清效果最佳,基于该多抗血清建立的OTC间接竞争ELISA检测方法半数抑制浓度(IC 50)为32.92 ng/mL,检测限(LOD)为1.3 ng/mL,牛奶样品中添加回收率在84.70%~87.45%,与金霉素、四环素的交叉反应率分别为5.27%,4.10%,与其他竞争物交叉反应率<0.4%.该试验成功合成了OTC完全抗原,获得了免疫学特性良好的OTC多抗血清,并建立了OTC免疫学检测方法.