文献类型： 中文期刊

作者： 颜跃弟 ¹ ; 傅洪拓 ¹ ; 乔慧 ² ; 白鸿坤 ³ ; 孙盛明 ² ; 蒋速飞 ² ; 熊贻伟 ² ; 龚永生 ² ; 金舒博 ² ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心

3.南京农业大学无锡渔业学院

关键词： 日本沼虾;精荚;游离精子;胰蛋白酶;正交试验

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2015 年 31 卷 02 期

页码： 107-111

收录情况： CSCD

摘要： 为了获得数量多且存活的游离青虾精子,首次采用胰蛋白酶消化日本沼虾精荚的方法,获得了游离日本沼虾的精子。通过观察游离精子形态,并经台盼蓝染色,以每克精荚所获得形态正常、结构完整且不被染色的存活精子数为依据,探究胰蛋白酶处理的最佳条件。在p H 7.1的条件下,设计三因素四水平正交试验,设置不同酶浓度(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%)、处理时间(5 min、10 min、15 min、20 min)和处理温度(30℃、35℃、40℃、45℃),根据正交试验结果确定酶处理最佳反应条件。结果表明,酶浓度对获得游离精子影响最大,其次是处理温度和处理时间。酶处理的最适条件为:酶浓度0.8%,处理时间10 min,处理温度40℃。经优化验证试验,表明上述理论组合确为最佳组合。本研究通过酶解法获得较多数量的存活游离精子,为进一步研究日本沼虾精子提供了获得游离精子的方法。