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猪博卡病毒不同基因型三重PCR检测方法的建立及初步应用

文献类型: 中文期刊

作者: 宏春慧 1 ; 杨兵 2 ; 覃湘婕 2 ; 周宏专 2 ; 徐福洲 2 ; 苏霞 2 ; 薛静 3 ; 张晓东 3 ; 王金洛 2 ;

作者机构: 1.北京农学院

2.北京市农林科学院

3.北京农业生物技术研究中心

关键词: 猪博卡病毒;基因型;三重PCR;检测

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2016 年 31 卷 02 期

页码: 12-16

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为鉴别猪博卡病毒1型、2型和3型3种基因型,根据猪博卡病毒基因序列分别设计3对针对保守区域的引物进行PCR扩增,扩增目的片段大小分别为645 bp(PBoV1型)、352 bp(PBoV2型)和259 bp(PBoV3型)。通过引物浓度和退火温度等条件优化,首次建立了同时检测猪博卡病毒3种基因型的三重PCR方法。所建立的三重PCR方法扩增其他猪病病毒结果均为阴性,最低检测限为8×10-7ng/μL。结果表明,该方法具有较好的特异性和敏感性。对临床样品进行三重PCR和单项PCR检测,对比结果显示符合率为100%。该方法的建立为猪博卡病毒3种不同基因型的鉴别检测提供了有效手段。

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