文献类型： 中文期刊

作者： 张浩南 ¹ ; 崔一芳 ² ; 郭芳芳 ² ; 丁保安 ¹ ; 徐福洲 ² ;

作者机构： 1.青海大学农牧学院

2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所

关键词： 细胞外脂肪酸结合蛋白;脂钙蛋白2;肠杆菌素;entB基因;弯曲菌

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2025 年 52 卷 002 期

页码： 654-667

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【背景】弯曲菌(Campylobacter)是一种重要的食源性病原细菌，在鸡肠道内高水平定殖，鸡天然免疫在该菌定殖中的作用机制尚未解析。【目的】探究鸡天然免疫相关的细胞外脂肪酸结合蛋白(extracellular fatty acid-binding protein, Ex-FABP)通过特异性结合肠杆菌素抑制弯曲菌生长的活性，为宿主发挥天然免疫功能提供理论基础。【方法】通过敲除大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3)的entB基因构建不分泌肠杆菌素的表达宿主菌，原核表达纯化鸡Ex-FABP蛋白和人源脂钙蛋白2(lipocalin-2, Lcn2),Western blotting鉴定表达蛋白与肠杆菌素特异性结合，分别在富铁和限铁培养条件下，验证Ex-FABP和Lcn2对大肠杆菌、沙门氏菌(Salmonella)及entB基因突变株的抑菌活性，继而通过外源添加肠杆菌素鉴定Ex-FABP和Lcn2对不同宿主源弯曲菌的抑菌活性。【结果】利用构建的宿主菌BL21(DE3)的entB基因突变株，成功表达和纯化Ex-FABP和Lcn2蛋白，体外结合试验证实表达蛋白可与肠杆菌素特异性结合。在限铁培养条件下，Ex-FABP和Lcn2对仅分泌肠杆菌素的大肠杆菌AN102具有显著抑制生长的作用，而对大肠杆菌ATCC25922、沙门氏菌CVCC1806、CVCC 1800及对应的entB缺失株均无抑制作用。最后证实Ex-FABP和Lcn2通过特异性结合肠杆菌素对5株不同宿主来源的弯曲菌均有显著抑制生长的作用。【结论】鸡Ex-FABP蛋白具有与Lcn2类似的功能，即在限铁环境下可特异性结合肠杆菌素，通过阻断细菌利用肠杆菌素摄取铁的途径来抑制其生长，发挥宿主天然免疫功能，为开发新型弯曲菌防控策略提供了理论依据。