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DNA未知片段APCR克隆的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 苗红梅 1 ; 岳彩鹏 2 ; 赵永英 1 ;

作者机构： 1.河南省农业科学院生物技术研究所

2.郑州大学生物工程系

关键词： APCR;DNA未知片段;小麦;启动子序列

期刊名称： 植物生理学通讯

ISSN： 0412-0922

年卷期： 2005 年 41 卷 04 期

页码： 509-512

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用锚定PCR(APCR)技术对未知的小麦淀粉合成关键酶基因gbssI和sbeIIa启动子序列进行扩增。通过对APCR反应进行优化,获得了gbssI启动子序列(4.1kb)和sbeIIa启动子序列(3.1kb)。结果表明:减少模板加入量(由1μL降低至1/100μL)和增大反应体积(由50μL增到100μL)均可在一定程度上减少非特异的结果出现;升高变性温度(由94℃提高到98℃)和延伸温度(由55℃提高到72℃)并延长延伸时间则能有效地消除APCR中的非特异性条带。

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