文献类型： 中文期刊
作者： 张宁 1 ; 丁培阳 2 ; 任东娜 1 ; 陈艺兰 1 ; 李雪洋 2 ; 常泽杰 2 ; 李青梅 3 ; 张改平 1 ;
作者机构： 1.西北农林科技大学动物医学院
2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室
3.河南省农业科学院
关键词： 非洲猪瘟病毒;H240R蛋白;单克隆抗体
期刊名称： 动物医学进展
ISSN： 1007-5038
年卷期： 2022 年 43 卷 008 期
页码： 1-6
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为制备抗非洲猪瘟病毒(ASFV)H240R蛋白单克隆抗体,首先构建原核表达质粒pET-29b-H240R,再进行蛋白表达与纯化,随后免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术制备、间接ELISA方法筛选获得单克隆抗体.结果显示,共获得4株杂交瘤细胞株,腹水效价均高于1:40000;亚型鉴定结果显示,3株单克隆抗体(12D6、21G3、8G7)重链亚类为IgG2b,13D2重链亚类为IgG1,轻链亚类均为k.Western blot和Dot blot鉴定结果表明,21G3、13D2株单克隆抗体识别的抗原表位为线性表位,而12D6和8G7识别的是构象表位.间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,4株单克隆抗体均能特异性识别HEK293T细胞中表达的H240R蛋白.制备了ASFV H240R蛋白单克隆抗体,为H240R蛋白的表位和功能研究奠定了基础.
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