文献类型： 中文期刊
作者： 臧科伟 1 ; 张春玲 2 ; 邹勇 2 ; 柴家前 1 ; 崔言顺 1 ;
作者机构： 1.山东农业大学
2.上海市农业科学院
关键词： 猪细小病毒;NS1基因;低温诱导;ELISA
期刊名称： 中国兽医学报
ISSN： 1005-4545
年卷期： 2009 年 29 卷 10 期
页码： 1247-1250
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 利用PCR技术从猪细小病毒的DNA模板中扩增了NS1的基因片段,将PCR产物克隆至pET32c载体,将构建好的重组质粒pET32c-NS1,转入表达宿主菌BL21中,利用低温诱导表达的方法,避免了包涵体的形成。Western-blot结果显示,表达产物有良好的生物活性。纯化后的重组蛋白作为抗原,包被酶标板,建立了检测猪细小病毒特异性抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被质量浓度为2.5 mg/L、血清最佳稀释度为1∶200。表达的NS1蛋白可作为免疫诊断试剂用于检测PPV,且能很好的区别灭活疫苗免疫猪和自然感染猪。
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