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一步法RT-PCR和两步法RT-PCR对蜜蜂病毒诊断研究的比较

文献类型： 中文期刊

作者： 贾慧茹 1 ; 周婷 1 ; 高夫超 2 ;

作者机构： 1.中国农业科学院蜜蜂研究所

2.黑龙江省农业科学院牡丹江分院

关键词： 蜜蜂病毒;一步法RT-PCR;两步法RT-PCR

期刊名称： 应用昆虫学报

ISSN： 2095-1353

年卷期： 2015 年 52 卷 02 期

页码： 351-355

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】探讨适合蜜蜂病毒病诊断的RT-PCR技术。【方法】从感染蜜蜂以色列急性麻痹病毒、残翅病毒、囊状幼虫病毒、急性麻痹病毒、黑蜂王台病毒以及慢性麻痹病毒的阳性样品中,分别提取这6种病毒的RNA。然后,同时应用一步法RT-PCR和两步法RT-PCR的反应体系对6种病毒扩增,并对两种方法的灵敏性进行比较和分析。【结果】上述两种方法分别得到158(IAPV)、269(DWV)、342(SBV)、460(ABPV)、536(BQCV)和774 bp(CBPV)的扩增片段,测序结果证实扩增片段符合预期。两步法RT-PCR可检测到更低浓度的病毒颗粒。【结论】结果表明,该2种方法均可快速、有效地诊断蜜蜂病毒。但两步法RT-PCR灵敏性更高。

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