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毕赤氏酵母SMD1168/HuIFNα-2b分泌型表达的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 周鹏 1 ; 郭安平 1 ; 沈文涛 1 ; 黎小瑛 1 ; 梁国栋 2 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室

2.海南国栋药物研究所

关键词： 毕赤氏酵母SMD1168;α-2b干扰素;分泌型表达

期刊名称： 药物生物技术

ISSN： 1005-8915

年卷期： 2003 年 10 卷 05 期

页码： 287-291

收录情况： CSCD

摘要： 利用毕赤氏酵母SMD1168构建huIFNα 2b分泌型高效表达工程菌株 ,以提高huIFNα 2b表达量和生物比活性 ,增强临床治疗效果和降低临床应用的毒性副作用。将克隆修饰的huIFNα 2b基因插入pGAPZα A之GAP启动子下游位点 ,构建成含α factor信号肽的重组表达载体 ,转入毕赤氏酵母 (Pichiapastoris)SMD1168,构建成分泌型表达huIFNα 2b的酵母工程菌株。SDS PAGE分析表明 ,该工程菌株huIFNα 2b表达量占菌体分泌总量的 50 %以上 ,表达量为 10 0～ 12 0 μg ml;MTT法测定纯化样品的生物比活性为 6 69× 10 8IU mg蛋白～ 1 11× 10 9IU mg蛋白 ,并通过柱层析分离纯化了huIFNα 2b ,纯度达 99 7% ,回收率达 15%～ 2 0 % ;Westernblotting分析表明表达的huIFNα 2b具有与天然huIFNα 2b相同的免疫原性

  • 相关文献

[1]海南PRSV-CP与rhIFNα-2b双价载体构建新策略. 周鹏,郭安平,黎小瑛. 2003

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