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猪圆环病毒2型orf2基因在奶山羊胎儿成纤维细胞中的表达与生物活性鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 高珊 1 ; 申培磊 1 ; 侯书宝 2 ; 徐洪龙 2 ; 卢清侠 3 ; 张勇; 张改平;

作者机构： 1.甘肃农业大学生命科学技术学院

2.甘肃农业大学动物医学院

3.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

关键词： 猪圆环病毒;乳腺表达载体;转染;奶山羊;胎儿成纤维细胞

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2017 年 37 卷 09 期

页码： 1653-1658

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得稳定表达猪圆环病毒2型(PCV-2)orf2基因的奶山羊胎儿成纤维细胞,将PCV-2 orf2基因与筛选基因neo表达框串联插入到pBC1质粒,得到重组的真核表达载体pBC1-orf2-neo。然后采用脂质体介导法将重组质粒转染至奶山羊胎儿成纤维细胞(gFFs),经G418筛选获得具有稳定抗性的阳性gFFs细胞株。RT-PCR分析显示,在获得的阳性gFFs细胞株中能够扩增出689bp的orf2基因和1 953bp的neo表达框,与预期结果相符。Western blot分析显示,获得了约37 000的表达产物,且能够与兔抗PCV-2Cap蛋白抗体发生反应。结果表明,orf2基因成功整合到山羊胎儿成纤维细胞染色体上并能够正确表达,表达产物具有良好的反应原性,这为构建分泌Cap蛋白的奶山羊乳腺生物反应器奠定了理论和物质基础。

  • 相关文献

[1]奶山羊胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特性分析. 马呈瑞,常卫华,曹会萍,张改平,卢清侠,张勇. 2015

[2]绿色荧光蛋白基因在山羊胎儿成纤维细胞中的表达. 楚秋霞,王二耀,吴姣,陈付英,王治方,辛晓玲,施巧婷,冯亚杰,李文军,魏成斌,徐照学. 2013

[3]规模化猪场猪圆环病毒病的诊断及综合防制. 游一,许保疆,王克领,郎利敏,张立宪,张青娴. 2009

[4]一例副猪嗜血杆菌和猪圆环病毒混合感染的诊治. 张立宪,王克领,郎利敏,游一,张青娴. 2010

[5]猪圆环病毒致病机理的研究进展. 冯丽丽,张改平,张丽萍,朱礼倩,李娇,杨苏珍. 2008

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