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小麦黄花叶病毒P1蛋白原核表达、抗血清制备及其检测

文献类型： 中文期刊

作者： 向荣 1 ; 孙丽英 2 ; 孙炳剑 2 ; 陈剑平 2 ;

作者机构： 1.浙江师范大学化学与生命科学学院

2.浙江省农业科学院病毒与生物技术研究所

关键词： 小麦黄花叶病毒;P1基因;克隆;原核表达;抗血清制备;血清学检测

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2011 年 23 卷 02 期

页码： 324-328

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用RT-PCR方法从感染小麦黄花叶病毒(Wheat yellowmosaic virus,WYMV)扬州分离物的小麦叶片中扩增获得该病毒P1基因的全长cDNA片段,并进行了序列分析。结果表明,P1基因编码区含有765个核苷酸,编码1个由255氨基酸组成分子量为28.2 kDa的蛋白。将P1基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中构建重组原核表达载体pGEX 6P-1-P1,经IPTG诱导,P1蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达GST-P1的融合蛋白,纯化并制备了P1蛋白的兔抗血清。利用此抗血清,可以检测WYMV病叶中的P1蛋白,但与提纯的WYMV粒子没有血清学反应,表明P1没有参与WYMV粒子的包装,是一种非结构蛋白。

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